2.×μm UHPLC色譜柱
要完全實(shí)現(xiàn)UHPLC色譜柱的更高柱效，就必須讓液相系統(tǒng)的擴(kuò)散效應(yīng)對(duì)色譜柱的影響盡可能小。小顆粒色譜柱，會(huì)讓色譜峰更窄更尖銳，提高分離度；但是，更窄的色譜峰，對(duì)柱外擴(kuò)散體積更為敏感。因此，根據(jù)系統(tǒng)的擴(kuò)散體積，匹配合適的色譜柱規(guī)格，對(duì)于實(shí)現(xiàn)分離性能至關(guān)重要。
如何選擇合適的亞三微米色譜柱？
根據(jù)如下四步驟加以考慮：
色譜填料/鍵合相的選擇性與耐受性：滿足目標(biāo)應(yīng)用的需要；
色譜柱長(zhǎng)與粒徑的比值L/dp：色譜柱的柱效水平是否滿足目標(biāo)應(yīng)用的分離度需求；
柱長(zhǎng)L與粒徑dp對(duì)柱壓的影響：考慮色譜柱運(yùn)行柱壓，是否能兼容您的液相系統(tǒng)；
色譜柱內(nèi)徑：對(duì)于擴(kuò)散體積較大的系統(tǒng)，選擇4.6 mm內(nèi)徑，可以減少系統(tǒng)對(duì)柱效的影響程度。
色譜柱規(guī)格選擇指導(dǎo)
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系統(tǒng)
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HPLC
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UHPLC
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UPLC
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擴(kuò)散體積測(cè)量值
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>40μL
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22-29μL
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<20μL
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常規(guī)操作壓力
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<4000 psi
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<10,000 psi
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<18,000 psi
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色譜柱粒徑
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3-5μm
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2-3μm
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<2μm
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色譜柱內(nèi)徑
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4.6 mm (3.0 mm)
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3.0mm (2.1mm)
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2.1mm (1.0 mm)
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色譜柱長(zhǎng)度
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75-250mm
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50-100mm
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≤150mm
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以上根據(jù)Waters LC系統(tǒng)來推薦色譜柱規(guī)格。
對(duì)任何LC系統(tǒng)都適用的柱規(guī)格
在轉(zhuǎn)移LC方法時(shí)，儀器譜帶展寬是需要確定的十分關(guān)鍵的LC儀器參數(shù)之一。了解譜帶展寬，能幫助色譜分離化學(xué)家所開發(fā)的方法，兼容任何一臺(tái)LC系統(tǒng)。如下色譜柱規(guī)格表，基于儀器譜帶展寬名義測(cè)量值。
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系統(tǒng)
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LC技術(shù)
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譜帶展寬*
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推薦色譜柱的粒徑與內(nèi)徑
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Shimadzu Prominence UFLC
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HPLC
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41μL
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XBridge 3.5, 5μm; XSelect 3.5, 5 μm;
CORTECS 2.7 μm
3.0–4.6 mm I.D.
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Alliance 2695 HPLC
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HPLC
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29 μL
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Agilent 1260 UHPLC (600 bar)
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HPLC
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28 pL
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Thermo Accela UHPLC
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HPLC
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21μL
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XBridge 2.5, 3.5, 5 μm; XSelect 2.5, 3.5, 5 μm;
CORTECS 2.7 μm 3.0 mm I.D.
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Agilent 1290 UHPLC (1200 bar)
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UHPLC
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17 μL
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ACQUITY Arc
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UHPLC
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23 μL
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XBridge 2.5, 3.5, 5 μm; XSelect 2.5, 3.5, 5 μm;
ACQUITY UPLC HSS 1.8 μm,
CORTECS 2.7 μm
3.0 mm I.D.
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ACQUITYUPLC
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UHPLC
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12 μL
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ACQUITY UPLC BEH 1.7 μm;
ACQUITY UPLC CSH 1.7 μm;
ACQUITY UPLC HSS 1.8 μm,
CORTECS 1.6 μm
2.1 mm I.D.
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ACQUITY UPLC H-Class W/Column Manager
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UPLC
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12 μL
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ACQUITY UPLC H-Class
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UPLC
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9μL
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*這些測(cè)量數(shù)值基于未經(jīng)調(diào)整的儀器，僅作為參考。對(duì)于系統(tǒng)的泵、管路連接、以及儀器參數(shù)的任何調(diào)整，都會(huì)改變?cè)搩x器的譜帶展寬。
